在ELISA實(shí)驗(yàn)中，研究人員需要進(jìn)行多次加樣步驟完成實(shí)驗(yàn)操作。對(duì)于常規(guī)雙抗體夾心法ELISA，一般有如下加樣步聚，即加樣本、加檢測(cè)抗體、加酶結(jié)合物、加底物（最后加終止液停止反應(yīng)）。

加樣步驟基礎(chǔ)知識(shí)

加樣步驟中一般使用微量加樣器（移液器，移液槍），按照實(shí)驗(yàn)規(guī)定的用量將液體成分加入酶標(biāo)板孔板中。每次加入新的液體組分前，應(yīng)更換新的吸頭，以免液體組分間發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。部分加樣步驟需使用稀釋后的液體組分，如標(biāo)準(zhǔn)品需要經(jīng)復(fù)溶倍比稀釋后上樣，抗體、濃縮酶結(jié)合物需稀釋為1×工作液，需要按照說(shuō)明書的稀釋要求，預(yù)先在試管、EP管等中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。

加抗體、酶結(jié)合物工作液和底物工作液時(shí)，可用定量多道加液器，節(jié)省加樣的時(shí)間和操作，更好地保證孔與孔間的平行，減少因操作帶來(lái)的誤差。

在ELISA中，一般需進(jìn)行45加樣。“45加樣"是什么？

45加樣，應(yīng)當(dāng)為45度加樣，即加樣槍的吸頭所在的直線應(yīng)當(dāng)與板條所在的直線呈45度角，吸頭貼著孔壁加入。

? 吸取樣品時(shí)，加樣槍吸頭不應(yīng)黏附多余的液體；加樣時(shí)不可90度向孔中滴加液體，因?yàn)檫@樣操作會(huì)導(dǎo)致液體殘留在吸頭上，導(dǎo)致加樣不準(zhǔn)確。

? 吸頭所在的直線與板條所在的直線所呈角度不可過(guò)小，會(huì)使液體殘留在酶標(biāo)板孔的孔壁上，導(dǎo)致加樣不準(zhǔn)確。

? 不要將吸頭伸入孔底，一方面若接觸孔底可能壓彎吸頭，另一方面吸頭浸入液面下容易產(chǎn)生氣泡，導(dǎo)致加樣不準(zhǔn)確。

以上為ELISA實(shí)驗(yàn)中加樣tips的全部?jī)?nèi)容，您學(xué)會(huì)了嗎？

如有疑問(wèn)，可咨詢欣博盛生物了解更多詳情。

關(guān)于欣博盛生物：

欣博盛生物科技有限公司成立于2007年，是一家力耕于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域的高新技術(shù)企業(yè)，專門從事以ELISA產(chǎn)品為主的生物試劑研發(fā)與銷售，致力于為廣大研究人員提供高品質(zhì)的科研產(chǎn)品。

欣博盛研發(fā)生產(chǎn)中心擁有完整的酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒研發(fā)和生產(chǎn)平臺(tái)，研發(fā)生產(chǎn)團(tuán)隊(duì)由具有近30年免疫檢測(cè)行業(yè)經(jīng)驗(yàn)的專家?guī)ьI(lǐng)，由具有生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、檢驗(yàn)學(xué)等相關(guān)專業(yè)和研發(fā)經(jīng)驗(yàn)的人員組成。廣泛與歐美知-名的抗原抗體生產(chǎn)公司和機(jī)構(gòu)開(kāi)展合作，篩選和委托定制高質(zhì)量的原料，采用行業(yè)內(nèi)質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)來(lái)研發(fā)生產(chǎn)ELISA試劑盒。公司自主研發(fā)的ELISA試劑盒在國(guó)內(nèi)眾多重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室廣泛使用，深受廣大科研人員的好評(píng)。欣博盛品牌 ELISA試劑盒自推出以來(lái)已先后在Nature, Cell, PNAS等國(guó)際期刊中被引用。

欣博盛生物現(xiàn)可提供三百余種不同指標(biāo)ELISA試劑盒，涵蓋各類常用指標(biāo)，更可提供ELISA定制與代測(cè)服務(wù)。更多詳情，歡迎咨詢欣博盛生物！